В начале 19 в. Слобожанщина стала центром украинского национально-культурного возрождения. В 1В05 г. в Харькове был основан первый на украинских землях в составе Российской империи университет. За первые 50 лет его существования высшее образование там получили 2800 чел.

С 1816 г. по 1819 г. в Харькове издавался первый в Украине массовый популярный журнал “Украинский вестник”, положивший начало печатанию научных материалов на украинском языке. В 1834 г. в Харькове были изданы “Малороссийские рассказы” Г. Квитки-Основьяненко, которого называли отцом украинской прозы. На Слобожанщине действовал украинский поэтический кружок харьковских романтиков (Амвросий Метлинский, Лев Боровиковский, Александр Корсун и др.), издавались альманахи “Молодик” (“Молодой месяц”), “УкраТнський альманах”, “Снш” (“Сноп”), в которых публиковались произведения П. Гулака-Артемовского, Е. Гребин-ки, Н. Костомарова. В Харькове выходил фольклорный сборник И. Срезневского “Запорожская старина” (1833—1838 гг.), была опубликована статья И. Срезневского “Взгляд на памятники украинской народной словесности” — первое печатное публичное выступление в защиту украинского языка. Расследованиями из украинской истории и истории украинского писательства начал свою научную деятельность в Харькове Н. Костомаров. В 1810— 1840 гг. появились первые труды по истории Слободской Украины, как-то:

И. Квитки — “Записки о слободских полках с начала их поселения до 1766 г.” (1812 г.); Г. Квитки-Основьяненко — “Историко-статистическое описание Слобожанщины”, “О слободских полках”, “Украинцы”, “История театра в Харькове”; И. Срезневского — “Историческое изображение гражданского устроения Слободской Украины”. Церковную историю Слобожанщины исследовал архиепископ харьковский Филарет. Во второй половине 19 в. научными исследованиями в области украинского языковедения и этнографии занимались профессор Харьковского университета А. Потебням его ученик Н. Сумцов, работали выдающиеся историки Д. Багалий, П. и А. Ефименко.

Со второй половины 1850 г. на Слобожанщине началась активная политическая жизнь. В 1856 г. группа студентов Харьковского университета во главе с Я. Бекманом, М. Муравским, П. Ефименко и П. Завадским организовали тайное политическое общество. Члены общества в журналах “Свободное слово” и “Гласность” подвергали критике самодержавный строй, требовали освобождения крестьян от крепостной зависимости, создали несколько воскресных школ, где изучались произведения Т. Шевченко. Общество было разгромлено в 1860 г. В середине 1860 г. в крупных городах Слободской Украины активно действовали громады, осуществлявшие национально-культурное просвещение. Летом 1891 г. харьковские студенты И. Липа, М. Базкевич и студенты Киевского университета В. Боровик, Н. Михневский создали тайную организацию Братство тарасовцев. В 1897 г. в Харькове возникла тайная Украинская студенческая громада, чле­нами которой были Д. Антонович, М: Русов, О. Коваленко и др. Подобные студенческие громады действовали в Киеве, Полтаве, но по численности (100 членов) харьковская была самой большой.

В январе 1900 г. на собрании студенческих громад Харькова была создана первая в подроссийской Украине политическая партия — Революционная украинская партия. В начале 1880-х гг. в Харькове действовал военный кружок “Народной воли”, а в начале ''890-х гг. возникли первые марксистские кружки. В 1898 г. был создан Харьковский комитет РСДРП. В начале 20 в. произошли крестьянские волнения в Богодуховском и Валковском уездах (Полтавско-Харьковское крестьянское восстание 1902 г.). В период революции 1905—1907 гг. в Слободской Украине вспыхивали политические забастовки и вооружённые выступления рабочих (Любо-тинское восстание 1905 г.. Харьковское восстание 1906 г.), крестьянские беспорядки в Сумском, Ахтырском, Харьковском, Змиевском уездах.